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液體培養基接種方法解讀

時間:2022-09-02 瀏覽次數:223

  液體培養基(liquidculturemedium),固體培養基的對應詞,是微生物或動植物細胞的液狀培養基。它具有進行通氣培養、振蕩培養的優點。在靜止的條件下,在菌體或培養細胞的周圍,形成透過養分的壁障,養分的攝入受到阻礙。由于在通氣或在振蕩的條件下,可消除這種阻礙以及增加供氧量,所以有利于細胞生長,提高生產量。




液體培養基接種方法解讀


  試管液體接種


  試管液體接種是將一定體積的樣品混懸液加入到盛有指/定液體培養基的試管內,或將一定體積、按標準規定條件下培養過的培養液接入盛有指/定液體培養基的試管內(有時是指接種環取一環,或移液管移液器移取一定的體積,例如0.1ml、1ml等)。涉及試管液體接種的操作有MPN法檢測大腸菌群/大腸桿菌,以及沙門氏菌、單增李斯特氏菌的二次增菌轉接操作等。


  此處以用移液器將一定體積的樣品混懸液接入到盛有指/定液體培養基的試管內為例,


 ?、儆镁凭尴静僮髋_面。將移液器吸頭盒放入酒精燈右側,靠近酒精燈放置。將需要進行液體轉接的試管插在試管架上,置于酒精燈左邊左手附近。將移液器調至合適的刻度放于右手附近的架子上。廢物缸放于右手能觸及的范圍內。


 ?、邳c燃酒精燈,左手于酒精燈火焰附近打開移液器吸頭盒,右手持移液器用力插取吸頭兩下以防吸頭松動脫落,拔出移液器并蓋上移液器吸頭盒盒蓋。左手取待轉接液體試管,試管底部位于左手手心,移液器吸頭和試管口應在酒精燈火焰周圍的無菌區域之內。


 ?、蹖⒃嚬苌煜蛴沂?。右手食指,中指,無名指握住移液器,拇指靠在移液器按鈕上,小指和掌心下緣合圍夾住試管帽并用力拔出。如果操作者的手比較小,可以靠食指無名指和小指握住移液器,拇指仍靠在液體按鈕上。而中指向外伸,靠中指內側和食指、無名指外側夾住試管帽。將試管口和移液器吸頭靠近火焰,試管口灼燒一周,在火焰附近將吸頭剛好伸入試管口,抵住試管內壁下側,同時按住移液器按鈕至一檔(輕微推不動)。不要將移液器吸頭伸到試管底部,而應傾斜試管使液面傾斜至試管口附近并沒過吸頭尖/端。右手拇指緩慢松開,使液體緩緩吸入洗頭,注意不要吸入空氣。如果有空氣吸入,必須將液體壓回試管重新吸取。當右手拇指完全松開時,撤離移液器,注意吸頭需盡量一直圍繞在在酒精燈火焰附近,并且吸頭務必保持向下姿勢以防止液體倒流入移液器內部引起污染。


 ?、芪暌后w后,將移液器撤離試管,移液器吸頭移到酒精燈火焰的遠離操作者的一側,將試管口在火焰上灼燒滅菌。


 ?、轀缇?,右手小指迅速將試管帽蓋上,此時移液器吸頭仍然要在火焰形成的無菌區域內,不可離酒精燈火焰太遠。蓋上試管帽將試管歸位。


 ?、拮笫秩〈D接入液體的試管,右手保持移液器吸頭在酒精燈火焰附近。


 ?、哂沂直3治找埔浩髯藙萑∠略嚬苊辈⒆茻芸?。將吸頭抵靠在試管口的內壁上,緩緩推動移液器按鈕至底(完全推至第二檔,使殘存在吸頭尖/端的液體也流出)。推出液體時注意不要將吸頭深入試管底部,也不要用力推導致液體飛濺。


 ?、嘧笫謱⒃嚬芸诳拷鹧鏈缇?,移液器吸頭移到酒精燈火焰的另一側。再次灼燒試管口


 ?、嵊沂直3治找埔浩髯藙輰⒃嚬苊鄙w上,將試管歸位。移取液體完畢后,按壓移液器滑動桿使吸頭脫落至廢物缸,移液器放回架子。熄滅酒精燈,將臺面消毒并收拾干凈。


  三角瓶液體接種


  相對于試管的液體接種培養,三角瓶接種培養的優勢在于通氣效果好。多見于霉菌或一些細菌的復壯培養或者搖床培養等。操作與前面提到的液體試管接種操作基本相同,最后將液體加入三角瓶的時候,三角瓶傾斜,移液器吸頭抵在三角瓶的內壁,緩緩將液體加入,避免噴濺和氣泡


  液體培養基接種是用接種環、移液器或吸管等工具,將菌體或菌液移至試管、三角瓶等容器中的液體培養基中的一種接種方法。其操作與前面斜面接種基本相同,但應注意:液體培養基試管管口或三角瓶瓶口略向上以免培養液流出;加入菌體時,應使接種環與管內壁輕輕研磨,使菌體擦下,塞好棉塞后,將試管在手掌心中輕輕敲打或輕輕搖晃三角瓶,使菌體混合均勻。


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